液相色譜儀分析中保留時間不重現(xiàn)有保留時間漂移和保留時間波動兩種情況。者是指保留時間僅沿單方向發(fā)生變化，后者指保留時間無固定規(guī)律的波動。保留時間漂移的原因有色譜柱平衡、固定相流失、色譜柱污染、流動相組成變化、流動相污染和疏水坍塌等。事實上，保留時間漂移往往是由色譜柱老化引起的。

一、色譜柱平衡：

液相色譜中保留時間發(fā)生漂移，先應(yīng)考慮色譜柱是否已用流動相wan全平衡。通常平衡需要10～20倍柱體積的流動相，但如果在流動相中加入少量添加劑（如離子對試劑），則需要相當(dāng)長的時間平衡色譜柱。

二、固定相流失：

固定相的穩(wěn)定性都是有限的，即使在推薦的pH值范圍內(nèi)使用，固定相也會慢慢水解。例如硅膠基質(zhì)在pH = 4時水解穩(wěn)定性zui好。

固定相水解速度與流動相類型和配體有關(guān)。雙官能團配體和三官能團配體比單官能團配體的鍵合相穩(wěn)定，長鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩(wěn)定，烷基鍵合相比氰基鍵合相穩(wěn)定的多。

經(jīng)常清洗色譜柱也會加速固定相水解。

三、色譜柱污染：

液相色譜柱是非常有效的吸附性過濾器，它可以過濾并吸附流動相攜帶的任何物質(zhì)。污染源可以是流動相本身、流動相容器、連接管、泵、進樣器、密封墊和樣品等。通常通過實驗可判斷污染來源。

如果樣品中有在色譜柱上保留很強的組分，這些組分可能是使保留時間漂移的潛在根源，根源通常是樣品基質(zhì)，可以通過固相萃取等樣品處理除去樣品基質(zhì)。通常樣品中強保留組分的分子量較高，保留時間漂移的同時或其后，反壓會增加。

四、流動相組成變化：

流動相組成的緩慢變化也是保留時間漂移的常見原因，如流動相中易揮發(fā)組分的揮發(fā)和循環(huán)使用流動相等。

五、流動相污染：